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量子点流动起来
研究者将量子点增加到传统荧光染料的应用系列中,可以大大扩展荧光免疫表型的功能。
作为最经常和那些迷人的显微图联系在一起的新事物,量子点因其具有的灵敏性特征,已被广泛地应用于成像领域。但是,美国国立卫生研究院疫苗研究中心的Mario Roederer及其同事,采用了这些荧光染料,希望能提高分辨免疫细胞亚群的能力。
免疫系统的复杂特征经翻译后表现为各种不同细胞类型表面上不同蛋白质的集合体;这些标记物可由荧光抗体检测技术和随后的流式细胞分析技术进行鉴定。流式细胞分析技术通常称为免疫表型技术。
“我们发现,仅仅通过实行单一措施,譬如说‘它们产生γ干扰素么?’或者‘它们是否分裂呢?’,我们不能对免疫分室的功能性进行完整的描述,但是,所有这些措施进行集合后,将会启动对这些有趣亚集的分辨,” Roederer说。利用这些荧光染料,Roederer及其同事已经能够做成12色的流式细胞分析器。具有一定光谱重叠的量子点,加入进来后目前可以对18色进行分辨。
然而,对于一种既定的实验来说,荧光板的选择仍处于试错的阶段。Roederer及其同事根据广泛使用荧光染料的体会,将不太丰富的标记物配合灵敏的试剂一起使用,并能体会到光谱重叠使得灵敏度下降。但是,为了开发出一种大型的荧光板,他们对每一种他们想使用的抗体的几种不同颜色都进行了测试。Roederer说:“开始时,我们把六种或者八种抗体以不同方式进行组合后再将它们进行混合,看发生了什么情况,然后我们开始在新加的试剂中进行分层处理并对荧光板进行持续的修改。”
他们最近在《自然-医学》上发表了一项新的研究报告。通过将共轭量子点抗体和共轭有机荧光染料抗体联合使用,他们试图对抗原特定型的T细胞的显型进行分析。在对这种17色的分析过程中,他们能够鉴定出预期的标记物,也能发现存在于不同种群之间的新的表型差异。
在成像过程中,将量子点加入到荧光标记调色板中,大大增加了灵敏度。正如Roederer所言,“在过去,我们一直局限于三四种不同的标记物,但现在情况不同了,我们正致力于寻找几十种不同的标记物,那样的话,我们在设计和实施那些我们试图检测荧光标记物的实验时,就会拥有更多的灵活性。”
注:夏雨译自2006年9月号的《自然-方法学》,版权为英国NPG出版集团所有。更多信息请访问:http://www.natureasia.com/ch/naturemethods
作为最经常和那些迷人的显微图联系在一起的新事物,量子点因其具有的灵敏性特征,已被广泛地应用于成像领域。但是,美国国立卫生研究院疫苗研究中心的Mario Roederer及其同事,采用了这些荧光染料,希望能提高分辨免疫细胞亚群的能力。
免疫系统的复杂特征经翻译后表现为各种不同细胞类型表面上不同蛋白质的集合体;这些标记物可由荧光抗体检测技术和随后的流式细胞分析技术进行鉴定。流式细胞分析技术通常称为免疫表型技术。
“我们发现,仅仅通过实行单一措施,譬如说‘它们产生γ干扰素么?’或者‘它们是否分裂呢?’,我们不能对免疫分室的功能性进行完整的描述,但是,所有这些措施进行集合后,将会启动对这些有趣亚集的分辨,” Roederer说。利用这些荧光染料,Roederer及其同事已经能够做成12色的流式细胞分析器。具有一定光谱重叠的量子点,加入进来后目前可以对18色进行分辨。
然而,对于一种既定的实验来说,荧光板的选择仍处于试错的阶段。Roederer及其同事根据广泛使用荧光染料的体会,将不太丰富的标记物配合灵敏的试剂一起使用,并能体会到光谱重叠使得灵敏度下降。但是,为了开发出一种大型的荧光板,他们对每一种他们想使用的抗体的几种不同颜色都进行了测试。Roederer说:“开始时,我们把六种或者八种抗体以不同方式进行组合后再将它们进行混合,看发生了什么情况,然后我们开始在新加的试剂中进行分层处理并对荧光板进行持续的修改。”
他们最近在《自然-医学》上发表了一项新的研究报告。通过将共轭量子点抗体和共轭有机荧光染料抗体联合使用,他们试图对抗原特定型的T细胞的显型进行分析。在对这种17色的分析过程中,他们能够鉴定出预期的标记物,也能发现存在于不同种群之间的新的表型差异。
在成像过程中,将量子点加入到荧光标记调色板中,大大增加了灵敏度。正如Roederer所言,“在过去,我们一直局限于三四种不同的标记物,但现在情况不同了,我们正致力于寻找几十种不同的标记物,那样的话,我们在设计和实施那些我们试图检测荧光标记物的实验时,就会拥有更多的灵活性。”
注:夏雨译自2006年9月号的《自然-方法学》,版权为英国NPG出版集团所有。更多信息请访问:http://www.natureasia.com/ch/naturemethods


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